高效液相色譜儀的工作原理

儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng)，樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相，被流動(dòng)相載入色譜柱(固定相)內(nèi)，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù)，在兩相中作相對運(yùn)動(dòng)時(shí)，經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別，被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出，通過檢測器時(shí)，樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀，數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。

高效液相色譜儀在各領(lǐng)域的應(yīng)用

1、高效液相色譜儀在石油化工領(lǐng)域的應(yīng)用：

高效液相色譜分析儀在石油生產(chǎn)鑒定中占有重要的作用，在石油化工，農(nóng)藥，環(huán)保等方面，經(jīng)常采用薄層色譜法(TLC)和氣相色譜法(OC)進(jìn)行含量測定，而液相色譜法(LC)只是用于對組分標(biāo)樣的測定和分離的可能性的研究。近幾年來，HPLC 在油品分析，尤其是在石油中多環(huán)芳烴、重質(zhì)烴的測定方面取得了突破性的進(jìn)展。以正己烷、二氯甲烷為流動(dòng)相，用多維高效液相色譜技術(shù)及適宜的梯度，實(shí)現(xiàn)了烴族良好的分離和檢測。

2、高效液相色譜儀在生命科學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用：

生命科學(xué)研究工作中，最大的難題就是基因的解密工作，從基因組DNA序列尚不能回答某基因的表達(dá)時(shí)間、表達(dá)量、蛋白質(zhì)翻譯后加工和修飾的情況、以及它們的亞細(xì)胞分布等等?，F(xiàn)代蛋白質(zhì)組的分析可嘗試使用第一向是體積排阻色譜的雙向HPLC 高效液相色譜作預(yù)分離。高效液相色譜和雙向電泳將會(huì)成為蛋白質(zhì)組學(xué)的重要分離工具。此外，在使用HPLC-MS測定人血漿中的依那普利及相對生物利用度和人體藥學(xué)動(dòng)力學(xué)研究時(shí)，采用高效液相色譜質(zhì)譜方法，電噴霧電離源正源選擇離子峰檢測，檢測效果顯著。

3、高效液相色譜儀在環(huán)境領(lǐng)域的應(yīng)用：

西方發(fā)達(dá)國家將HPLC方法作為常用的環(huán)境監(jiān)測方法。如美國EPA531方法，用高效液相色譜-熒光法測定飲用水中的N一甲基氨基甲酸酯殺蟲劑; EPA605 方法用HPLC/電化學(xué)法測廢水中的聯(lián)苯胺類化合物; EPA8310方法用LC/熒光分析固體廢棄物中的多環(huán)芳烴，就連氣體中的有害有機(jī)物不少也是用HPLC測定。HPLC 已在環(huán)境分析中得到廣泛應(yīng)用，特別適用于低揮發(fā)性、分子量大、熱穩(wěn)定性差的有機(jī)污染物質(zhì)的分離和分析。如多環(huán)芳烴、酚類、多環(huán)聯(lián)苯、鄰苯二甲酸酯類、聯(lián)苯胺類、陰離子表面活性劑、有機(jī)農(nóng)藥、除草劑等。

4、 高效液相色譜儀在醫(yī)藥領(lǐng)域的應(yīng)用：

近年來高效液相色譜法在藥物分析中占主要地位，據(jù)美國藥典22版載，HPLC在含量測定方法中位居第一。按照在藥物分析中的應(yīng)用，高效液相色譜儀主要有四個(gè)作用：① 分離分析藥物的組分含量：由于一種藥劑常含有多組分，色譜方法是既能分離又能定量的方法；② 藥物生產(chǎn)中進(jìn)行中間控制：生產(chǎn)抗菌素時(shí)，首先要了解發(fā)酵液中的主體與付產(chǎn)物的存在情況； ③ 分析藥物在體內(nèi)的殘量，這是近來研究新藥效能很主要的內(nèi)容之一。如冬凌草甲素是植物中的一組分，有抗癌效果，但是毒性大，測定其在血清中含量很重要； ④ 測定藥物在各種器官中的代謝產(chǎn)物，特別是研究藥物的代謝產(chǎn)物在血清中存在的情況。

5、高效液相色譜儀在食品領(lǐng)域的應(yīng)用：

食品安全問題一直是所有消費(fèi)者都共同關(guān)注的問題，隨著利益化的驅(qū)動(dòng)，食品安全問題在近年來越來越突出，檢驗(yàn)食品安全成為一項(xiàng)極為重要的程序。高效液相色譜法是食品檢測中具有代表性的一種方法，主要是針對食品中的碳水化合物、維生素、蛋白質(zhì)、氨基酸、添加劑、激素、霉菌毒素、農(nóng)藥殘留、獸藥殘留、無機(jī)成分等進(jìn)行分析，保障食品安全。

綜上所述，高效液相色譜儀主要是采用新的科研技術(shù)，在化工生產(chǎn)和制藥上占有領(lǐng)先的水平，在生物化工、食品安全、醫(yī)學(xué)和環(huán)境等領(lǐng)域也獲得了廣泛的應(yīng)用和推廣。與一般的檢測方法相比，高效液相色譜儀分析其特點(diǎn)是分析速度快、分離效率高、檢測靈敏度高、檢測自動(dòng)化、適用范圍廣、組分易回收、樣品處理較簡單 ，具有更好的可行性和準(zhǔn)確性。社會(huì)科技發(fā)展越來越迅速，對于物質(zhì)的分析檢測更加看重，高效液相色譜分析不僅具有研究意義，還有相當(dāng)長的發(fā)展前景。